1.本站不该用户上传的文档完整性，不预览、不比对内容而直接下载产生的问题本站不予受理。 1------------------------------学院代号 10716 学 号 0 专业代码 100506 密 级 陕 西 中 医 学 院 Shaanxi University of Chinese Medicine 硕士学位论文 马齿苋、大蓟水煎剂对溃疡性结肠炎 模型小鼠IL-8 影响的实验研究 学 位 申 请 人 郝思杨 专 业 名 称 中医内科学 申请 学位类型 临床医学硕士学术学位 指导 教师姓名 刘力 教授 主任医师 论文 提交日期 2013 年 4 月 2------------------------------ 陕西中医学院学位论文独创性声明及使用授权声明 学位论文独创性声明 本人声明： 所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，进行研究工 作所取得的，无抄袭及行为。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论 文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品。对本文的研究做出重要贡 献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律 结果并由本人所承担的法律责任。 学位论文作者签名＿＿＿＿＿ 日 期： 年 月 日 关于学位论文使用授权的声明 陕西中医学院有权保留使用本人学位论文，同意学院按向国家有关部门机构 送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权陕西中医学院可以将本学 位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印 手段保存和汇编本学位论文。可以公布（包括刊登）论文的全部或部分内容。 （保密论文在解密后应遵守此） 论文作者签名＿＿＿＿＿日 期： 年 月 日 论文导师签名＿＿＿＿＿日 期： 年 月 日 3------------------------------ 中文摘要 目的：本课题的研究主要为，对采用葡聚糖硫酸钠的溃疡性结肠炎模型小鼠 用马齿苋、大蓟水煎剂进行干预治疗，并用西药柳氮磺胺吡啶肠溶片作为对比药进行 对照，通过检测白介素8 （IL-8）在模型小鼠的含量水平，以及观察小鼠的一般状况、 体重、结肠黏膜的病理形态，观察马齿苋、大蓟水煎剂对溃疡性结肠炎小鼠的治疗作 用，并探讨其作用机理，为治疗溃疡性结肠炎提供一定的实验基础。 方法：清洁级雄性昆明小鼠160 只，购回后用混合配方饲料（西安交通大学医学 院实验动物中心提供）喂养，饮水，每日更换饮水、饲料，保持小鼠生活环 境通风及清洁卫生。购回后适应性喂养7 天，随机抽取 12 只作为空白组，对其余小 鼠给予3%的葡聚糖硫酸钠溶液（DSS）1ml/ 只/天灌胃 14 天，以制备溃疡性结肠炎模 型，通过观察对比小鼠的一般状况、体重变化及粪便隐血实验，确定造模是否成功。 待造模成功后将剩余模型小鼠随机分为模型对照组；西药组（柳氮磺胺吡啶肠溶片 组）；马齿苋、大蓟3:1 大剂量组；马齿苋、大蓟3:1 中剂量组；马齿苋、大蓟3:1 小 剂量组；马齿苋、大蓟2:1 大剂量组；马齿苋、大蓟2:1 中剂量组；马齿苋、大蓟2:1 小剂量组；马齿苋、大蓟1:1 大剂量组；马齿苋、大蓟1:1 中剂量组；马齿苋、大蓟 1:1 小剂量组；（计11 组，共计12 组）每组10 只。分组后开始给药，空白组：每日 以生理盐水灌胃，1ml/ 只/天；模型对照组：每日以生理盐水灌胃，1ml/ 只/天；西药组： 每日以浓度为0.009g/ml 的柳氮磺吡啶肠溶片混悬液灌胃，1ml/ 只/天；马齿苋、大蓟 3:1 大剂量组：每日以浓度为0.36g/ml 的水煎剂灌胃，1ml/ 只/天；马齿苋、大蓟3:1 中剂量组：每日以浓度为0.24g/ml 的水煎剂灌胃，1ml/ 只/天；马齿苋、大蓟3:1 小 剂量组：每日以浓度为0.12g/ml 的水煎剂灌胃，1ml/ 只/天；马齿苋、大蓟2:1 大剂 量组：每日以浓度为0.40g/ml 的水煎剂灌胃，1ml/ 只/天；马齿苋、大蓟2:1 中剂量 组：每日以浓度为0.27g/ml 的水煎剂灌胃，1ml/ 只/天；马齿苋、大蓟2:1 小剂量组： 每日以浓度为0.14g/ml 的水煎剂灌胃，1ml/ 只/天；马齿苋、大蓟 1:1 大剂量组：每 日以浓度为0.54g/ml 的水煎剂灌胃，1ml/ 只/天；马齿苋、大蓟 1:1 中剂量组：每日 以浓度为0.36g/ml 的水煎剂灌胃，1ml/ 只/天。共给药14 天。给药期间观察各组小鼠 的一般状况、体重变化及粪便隐血实验，于给药后第 14 天处死所有小鼠，取小鼠结 肠组织测定IL-8 的水平，并观察结肠粘膜变化情况。 结果：治疗后，中药马齿苋、大蓟水煎剂和西药柳氮磺胺吡啶肠溶片灌胃均可降 4------------------------------低小鼠肠组织中 IL-8 的含量，但是受到不同比例，不同剂量的给药方式的影响，大 剂量组效果优于中剂量组、小剂量组、相当于西药组；3:1 组优于1:1 组、2:1 组、相 当于西药组。3:1 大剂量组效果最佳，与柳氮磺胺吡啶肠溶片效果相当，1:1 组、2:1 组中小剂量效果不及柳氮磺胺吡啶肠溶片。 结论：通过实验发现经马齿苋、大蓟水煎剂治疗的溃疡性结肠炎模型小鼠一般情 况改善，小鼠 IL-8 水平明显降低，表明马齿苋、大蓟水煎剂有下调促炎细胞因子的 作用，可以通过降低溃疡性结肠炎小鼠 IL-8 水平达到控制炎症的目的，并起到与西 药柳氮磺胺吡啶肠溶片相当的治疗作用，肯定了马齿苋、大蓟对溃疡性结肠炎的疗效。 关键词：马齿苋、大蓟水煎剂；溃疡性结肠炎；白介素8；实验研究 5------------------------------ Purslane, thistle water decoction on Ulcerative Colitis model in mice on the impact of IL - 8 experimental study Abstract Objective：this topic research, through the experiment with purslane, thistle water decoction of ulcerative colitis model in mice induced by dextran sodium sulte to intervene in mice, and the western medicine of willow nitrogen sulphanilamide pyridine enteric-coated metformin hydrochloride were compared, by detecting the level of interleukin 8 (IL 8) in mice, and observe the general condition, body weight in mice, colonic mucosa pathological morphology, observation of purslane, thistle of water decoction in the treatment of ulcerative colitis in mice, and explore its action mechanism, providing some experimental basis for the treatment of ulcerative colitis. Methods：160 grade clean male kunming mice, buy back after using mixed formula feed (experimental animal center of xi an jiaotong university medical school feeding, free food, drinking water change daily drinking water, feed, ventilation and clean living environment keep mice. Adaptive feed 7 days after buy, randomly selected 12 as blank group, for the rest of the mice given 3% dextran sodium sulte (DSS) 1 ml solution / / day to fill the stomach only 14 days, to the preparation of ulcerative colitis model, general condition, body weight of mice by observing the contrast change and fecal occult blood test, to determine whether building success.After waiting for building successful residual model mice were randomly divided into blank control group; The western medicine group (willow nitrogen sulphanilamide pyridine enteric-coated metformin hydrochloride group); Purslane, thistle 3:1 high-dose group; Purslane, thistle 3:1 in the dose group; Purslane, thistle 3:1, small dose group; Purslane, thistle 2:1 high-dose group; Purslane, thistle 2-1 in the dose group; Purslane, thistle 2:1 small dose group; Purslane, thistle 1:1 high dose group; Purslane, thistle 1:1 dose group; Purslane 1:1 with thistle and small dose group; (11 groups, group a total of 12) 12 in each 6------------------------------group.Began after dosing ，group and blank group: daily with physiological saline lavage, 1 ml/only/day; Blank control group: daily with physiological saline lavage, 1 ml/only/day; Western medicine group: daily with concentration of 0.009 g/ml sulfonyl pyridine of willow nitrogen enteric-coated metformin hydrochloride suspension liquid lavage, 1 ml/only/day; Purslane, thistle 3:1 high-dose group: daily in a concentration of 0.36 g/ml water decoction lavage, 1 ml/only/day; Purslane, thistle 3:1 dose groups: daily in a concentration of 0.24 g/ml water decoction lavage, 1 ml/only/day; Purslane, thistle 3:1 low-dose group: daily in a concentration of 0.12 g/ml water decoction lavage, 1 ml/only/day; Purslane, thistle 2:1 high-dose group: daily in a concentration of 0.40 g/ml water decoction lavage, 1 ml/only/day; Purslane, thistle 2-1 in the dose group: daily in a concentration of 0.27 g/ml water decoction lavage, 1 ml/only/day; Purslane, thistle 2:1 low-dose group: daily in a concentration of 0.14 g/ml water decoction lavage, 1 ml/only/day; Purslane, thistle 1:1 high-dose group: daily in a concentration of 0.54 g/ml water decoction lavage, 1 ml/only/day; Purslane, thistle 1:1 dose groups: daily in a concentration of 0.36 g/ml water decoction lavage, 1 ml/only/day. For 14 days. Drug delivery during the observation groups general status, changes in body weight in mice and fecal occult blood test, on the 15th day after the treatment to be put to death all mice, mice colon tissue measuring the level of IL - 8 and observe the colon mucosa changes. Results ：after treatment, Chinese medicine portulaca, thistle water decoction and western medicine of willow nitrogen sulphanilamide pyridine enteric-coated metformin hydrochloride gastric intestinal tissue in mice can be decreased by reducing the levels of IL - 8, but by different proportion, the influence of different doses of the drug delivery way, large dose group is better than middle dose group, small dose group, the equivalent of western medicine group; Better than 1:1, 2:1 and 3:1 group of western medicine group. Best 3:1 high-dose group, and the effects of willow nitrogen sulphanilamide 7------------------------------pyridine enteric-coated metformin hydrochloride, small and medium-sized dose effect is less than 1:1, 2:1 of willow nitrogen sulphanilamide pyridine enteric-coated metformin hydrochloride. Conclusion：through the experiment found that the purslane, thistle water decoction treatment of ulcerative colitis model in mice generally improved, IL - 8 level decreased significantly in mice, purslane, thistle water decoction has a cut in the role of proinflammatory cytokines, can reduce the ulcerative colitis in mice by IL - 8 level to achieve the goal of controlling inflammation, and play with the therapeutic effect of willow nitrogen sulphanilamide pyridine enteric-coated metformin hydrochloride is western medicine, affirmed the purslane, thistle, curative effect of ulcerative colitis. Keywords ：purslane, thistle water decoction; Ulcerative colitis; Interleukin 8; Experimental study on Author: HaoSiyang Tutor: Liu Li 8------------------------------ 英文缩略词表 缩写 原词 中文 UC ulcerative colitis 溃疡性结肠炎 DSS dextran sulte sodium 葡聚糖硫酸钠 IL-8 Interleukin 8 白细胞介素8 SASP Salicylazosulphapy ridine 水杨酸偶氮磺胺吡啶 5-ASA 5 - aminosalicylic acid 5-氨基水杨酸 IPAA ideal pouch-anal canalanastomosis 回肠贮袋-肛管吻合术 CK cytokine 细胞因子 9------------------------------ 目 录 引 言 1 实验研究 3 1.材料和方法 3 1.1材料3 1.2 方法5 2.取材及检测过程 6 2.1 取材6 2.2 粪隐血实验6 2.3HE 染色7 2.4 指标检测7 3.统计方法 7 4.结果与分析 8 4.1 一般状况与体重变化8 4.2 结肠变化 12 4.3 检测指标 14 5.讨论 15 5.1 指标的选择 15 5.2 对照药物的选择 16 5.3 造模方法的选择 17 5.4 存在的问题与展望 17 结 论 18 文献综述 19 综述一 中医对溃疡性结肠炎的认识及治疗研究进展 19 1.历史沿革 19 2.病因病机 19 3.中医治疗溃疡性结肠炎的研究进展 21 10------------------------------3.1 治则21 3.2 中医药治疗22 3.3 医结合治疗28 综述二 现代医学对溃疡性结肠炎的认识及治疗研究进展 31 1.病因与发病机制 31 2.现代医学对溃疡性结肠炎的治疗研究进展 33 综述三 IL-8 在溃疡性结肠炎中的作用36 综述四 马齿苋、大蓟的现代药理研究进展 38 马齿苋的现代药理研究进展 38 大蓟的现代药理研究进展 41 参考文献 45 附 录54 致 谢57 11------------------------------ 马齿苋、大蓟水煎剂对溃疡性结肠炎模型小鼠 IL-8 影响的实验研究 引 言 溃疡性结肠炎于1859 年由Wilks 首先描述，1920 年被医学界，我国于1956 [1] 年首次报道 。溃疡性结肠炎 （ulcerative colitis，UC)，又称慢性非性溃疡 性结肠炎，是一种病因不明的肠道慢性炎症性疾病，以结肠黏膜慢性炎症和溃疡形成 为主要病理特点，主要直肠、乙状结肠，也可累及全结肠，主要症状有腹痛、腹 泻、黏液脓血便及里急后重等，是临床上的常见疾病。 随着我国社会经济发展及生活水平的不断提高，由于不合理的饮食生活习惯等各 种因素的影响，使溃疡性结肠炎患者逐年增多，其发病率呈不断增长的趋势。溃疡性 结肠炎可发生在任何年龄，多见于青壮年，也可见于儿童或老年人，男女发病率无明 显差别，病情轻重不等，容易复发，严重影响着人们的健康，受到医学界的广泛关注。 溃疡性结肠炎的发病原因至今尚未完全明确，一般认为本病主要与免疫、感染、 [2] 遗传、神经等方面的因素有关 。随着免疫学的不断研究，目前认为是在遗传物 质和因素的基础上，由于各种微生物抗原的刺激，激活体内免疫系统，导致细胞 因子网络的平衡受到，各种炎症细胞活化、粘附表达异常，并向炎性反应部 [3] 位聚集，多种炎性因子，从而导致肠组织的慢性炎症反应 。因此，近年来各种 [4] 炎症细胞、细胞因子在UC 发病中的作用倍受重视 。免疫学因素在其发病过程中的 重要机制已经得到了广泛的认识。研究发现溃疡性结肠炎患者存在自身免疫、体液免 疫、细胞免疫等多种免疫功能异常，现已细胞因子在局部炎症反应和免疫反应中 起重要作用。肿瘤坏死因子（TNF ）和 IL-8 等促炎症细胞因子是的能介导溃疡 性结肠炎发病的细胞因子，而一些具有抗炎作用的细胞因子，如IL-4 、IL-10 等，在 维持肠道正常的免疫功能中起重要作用。如果促炎与抗炎因子的平衡状态被，促 炎因子一方占据优势，就会导致炎症的发生，从而引起本病。 祖国医学根据溃疡性结肠炎的病因、病机及临床表现，将其归属于“泄泻”、“痢 疾”、 “肠癖”、“肠风”、“滞下”、“便血”等范畴。中医学认为本病的发生多是在脾 胃虚弱的基础上感受外邪、饮食不慎或忧思恼怒导致脾胃受损，引起脾不健运，脾胃 升降功能失调，不能受纳水谷和运化精微，以至水反成湿，谷反成滞，肠道功能失职， 脉络受损，清浊不分，混杂而下。中药天然安全，疗效确切，已有几千年的应用历史， 因此通过对中药的研究以及中医药治疗溃疡性结肠炎的作用机理的研究，对进一步用 于治疗溃疡性结肠炎具有十分重大的意义。 1 12------------------------------ 陕西中医学院2013 届硕士学位论文 马齿苋（Portulaca oleracea L ）始载于《新修本草》，又名马齿菜、蚂蚁菜、长寿 菜、草等，系马齿苋科马齿苋属一年生肉质草本植物。马齿苋资源丰富，在我国 各地均有分布，是我国的传统中药，已有数千年的应用历史。《本草纲目》关于马齿 苋的记载：“其叶并比如马齿，而性滑利似苋，故名”。马齿苋性寒、味酸、无毒；入 心、肝、脾、大肠经，具有清热解毒、利水去湿、散血消肿、消炎止痛、止血凉血、 止痢、止消渴，防治多种疾病等功效，可用于治疗肠炎、痢疾、阑尾炎、腮腺炎、百 日咳、尿道感染、疮疡肿毒等多种疾病。我国马齿苋分布广泛，资源极其丰富，且价 格低廉，研究开发具有极为广阔的前景。现代药理研究发现，马齿苋水煎液能减轻结 肠粘膜组织急性损伤程度，具有明显的抗炎效果。病理学结果也显示马齿苋水煎液对 溃疡面具有明显的修复作用。 大蓟，苦泻清凉，其性下行，入心肝血分，既能清血热而凉血，又能散瘀滞而消 肿，止血不留瘀，虽寒凉而不伤胃，且能利尿，故具有凉血止血、祛瘀消痈，清热利 尿的功能，适于血热妄行所致的多种出血证及火热毒邪蕴结而致的痈疽疮毒等症。现 代药理研究发现，大蓟能凉血止血，已有研究报道其止血的有效成份为黄酮类化合物 柳穿鱼叶苷，该物质能较好的促进凝血，而且比已知的止血药氨甲环酸的止血效果要 好的多，且治疗效果确切。临床用于治疗溃疡性结肠炎，本病病位在结肠，病变主要 限于大肠粘膜及粘膜下层，因大蓟其止血不留瘀，通过导瘀止血、消炎活血之功，减 轻便血，加之其凉而能行，行而带补，兼疗痈肿之效，可以修复溃疡面，达到整体改 善肠管血运，减轻血管内皮细胞损伤之效。 导师刘力教授多年来一直对溃疡性结肠炎进行深入的研究，并结合自己丰富的临 床经验，长期在临床工作中相须使用中药马齿苋和大蓟对溃疡性结肠炎患者进行治 疗，取得了十分满意的疗效。为了充分利用和开发我国的中医药资源，进一步研究马 齿苋、大蓟对溃疡性结肠炎的治疗作用，在导师的悉心指导下，我们设计并进行了本 实验研究。我们通过对溃疡性结肠炎模型小鼠的一般状况、体重变化、结肠粘膜的观 察，以及小鼠 IL-8 的检测，发现马齿苋、大蓟水煎剂能明显改善溃疡性结肠炎小鼠 的一般状况和体重变化，显著降低小鼠 IL-8 的水平，从而控制炎症，对溃疡性结肠 炎有治疗作用。希望本次实验能为马齿苋、大蓟对溃疡性结肠炎的治疗作用提供一定 的实验基础，从而为临床进一步推广应用马齿苋、大蓟治疗溃疡性结肠炎提供一定的 实验依据。 2 13------------------------------ 马齿苋、大蓟水煎剂对溃疡性结肠炎模型小鼠 IL-8 影响的实验研究 实验研究 1.材料和方法 1.1材料 1.1.1 动物 清洁级健康雄性昆明小鼠 160 只，体重 18-22g，由西安交通大学医学院实验动 物中心提供，动物合格证号：SCXK(陕)2007-001。 1.1.2 主要试剂 葡聚糖硫酸钠(DSS)：由上海西宝生物科技有限公司生产，量为5000，规格 为50g,用时溶于蒸馏水配制成浓度3%的DSS 溶液。 PBS （磷酸盐缓冲液）：由博奥森公司生产，2-8℃保存备用。 邻联甲苯胺：由天津市科密欧化学试剂有限公司生产，常温保存备用 36%乙酸：由天津市天力化学试剂有限公司生产，常温保存备用 3%过氧化氢：由安徽安特生物化学有限公司生产，常温保存备用 甲醛：由安徽安特生物化学有限公司生产，常温保存备用 苏木素染色液：由博奥森公司生产，常温保存备用。 伊红染色液：由博奥森公司生产，常温保存备用。 IL-8 试剂盒：由南京建成生物工程研究所生产，4℃保存。 1.1.3 药物 马齿苋、大蓟水煎剂：主要成分为马齿苋和大蓟，其饮片均从陕西中医学院附属 医院中药房一次性选购。马齿苋、大蓟按不同比例不同剂量分组，然后按照《实验动 物和动物实验技术》（中国中医药出版社 2003 版 P145）中动物给药量计算：已知A 种动物每kg 体重用药量，欲估算B 种动物每kg 体重用药剂量时，可先查表（略）， 找出折算系数（W）（60kg 与20g 小鼠剂量折算系数为9.01），再按下式计算：B 种动物的剂量(mg/kg)=W×A 种动物的剂量(mg/kg)；人的标准体重按 60kg 算，小鼠 的标准体重按20g 计算。分别用蒸馏水将马齿苋、大蓟不同比例不同剂量常规煎煮， 并浓缩至所需浓度，4℃冰箱保存备用，用前稍加热。（具体药对剂量分组详见表1）。 3 14------------------------------ 陕西中医学院2013 届硕士学位论文 表1 中药药对剂量分组 中药药对 配伍比例 配伍剂量（g） 药液浓度（g/ml） 大剂量（D） 90:90 0.54 1：1 中剂量（Z） 60:60 0.36 小剂量（X） 30:30 0.18 大剂量（D） 90:45 0.4 马齿苋与大蓟 2：1 中剂量（Z） 60:30 0.27 小剂量（X） 30:15 0.14 大剂量（D） 90:30 0.36 3：1 中剂量（Z） 60:20 0.24 小剂量（X） 30:10 0.12 备注：文中出现“药对”字样，如无特殊说明，均指“马齿苋与大蓟”。 对照药：柳氮磺胺吡啶肠溶片，由上海信谊嘉华药业有限公司生产，国药准字： H31020557，规格0.25g/片，常用剂量初剂量为 1 日2～3g，分3～4 次口服， 无明显不适时，可渐增至 1 日4～6g,待症状缓解后可减至 1 日1.5～2g。按上 述方法计算出小鼠的等效剂量为 450.5mg/kg.d，经研磨、溶解，配制成 0.009g/ml 的混悬液，置冰箱4℃备用。 1.1.4 主要设备及仪器 普通冰箱 KK25F68TI 江苏西门子电器生产有限公司 计数天平 JS-06DMG 成都普瑞逊电子有限公司 电子天平 JA2003N 上海精密科学仪器有限公司 可调高速匀浆器 FSH-2 金坛市恒丰仪器厂 低速离心机 KDC-40 科大创新股份有限公司 微量移液器 QY-10、QY100 青云卓立精密设备有限公司 电热恒温水箱 HH-S8 科伟永兴仪器有限公司 全自动酶标仪 RT-2100C 深圳雷杜电子有限公司 生物显微镜 BA200 厦门麦克奥迪 生物组织自动脱水机 ZT-12J 湖北孝感市亚光医用电子技术有限公司 生物组织包埋机 JB-L6 武汉俊杰电子有限公司 生物组织包埋机 （冷台）JB-L6 武汉俊杰电子有限公司 4 15------------------------------ 马齿苋、大蓟水煎剂对溃疡性结肠炎模型小鼠 IL-8 影响的实验研究 切片机 JJQ-P2016J 武汉俊杰电子有限公司 1.1.5 主要器材 灌胃针、注射器、镊子、滤纸、剪刀、烧杯、量筒、离心管、微量移液器及枪头、 载玻片、盖玻片等。 1.2 方法 1.2.1造模 清洁级雄性昆明小鼠160 只，购回后用混合配方饲料（西安交通大学医学院实验 动物中心提供）喂养，饮水，每日更换饮水、饲料，保持小鼠生活通风 及清洁卫生。购回后适应性喂养7 天，随机抽取 12 只作为空白组，对其余小鼠给予 3%的葡聚糖硫酸钠溶液（DSS）1ml/ 只/天灌胃以制备溃疡性结肠炎模型，14 天后通过 观察对比小鼠的一般状况、体重变化、粪便隐血实验，并随机抽取空白小鼠2 只，模 型小鼠22 只处死，并检测结肠组织液中IL-8 的含量以确定造模是否成功。 1.2.2 分组 待造模成功后将剩余模型小鼠随机分为模型对照组（生理盐水组）；西药组（柳 氮磺胺吡啶肠溶片组）；马齿苋、大蓟3:1 大剂量组；马齿苋、大蓟3:1 中剂量组；马 齿苋、大蓟3:1 小剂量组；马齿苋、大蓟2:1 大剂量组；马齿苋、大蓟2:1 中剂量组； 马齿苋、大蓟2:1 小剂量组；马齿苋、大蓟1:1 大剂量组；马齿苋、大蓟1:1 中剂量 组；马齿苋、大蓟1:1 小剂量组；（计11 组，共计12 组）每组10 只。 1.2.3 给药 分组后开始给药，共给药 14 天。同时观察对比小鼠的一般情况、体重变化及粪 便隐血实验。具体给药措施如下： 空白组：每日以生理盐水灌胃，1ml/ 只/天； 模型对照组：每日以生理盐水灌胃，1ml/ 只/天； 西药组：每日以浓度为0.009g/ml 的柳氮磺吡啶肠溶片混悬液灌胃，1ml/ 只/天； 马齿苋、大蓟3:1 大剂量组：每日以浓度为0.36g/ml 的水煎剂灌胃，1ml/ 只/天； 马齿苋、大蓟3:1 中剂量组：每日以浓度为0.24g/ml 的水煎剂灌胃，1ml/ 只/天； 马齿苋、大蓟3:1 小剂量组：每日以浓度为0.12g/ml 的水煎剂灌胃，1ml/ 只/天； 马齿苋、大蓟2:1 大剂量组：每日以浓度为0.40g/ml 的水煎剂灌胃，1ml/ 只/天； 马齿苋、大蓟2:1 中剂量组：每日以浓度为0.27g/ml 的水煎剂灌胃，1ml/ 只/天； 马齿苋、大蓟2:1 小剂量组：每日以浓度为0.14g/ml 的水煎剂灌胃，1ml/ 只/天； 5 16------------------------------ 陕西中医学院2013 届硕士学位论文 马齿苋、大蓟1:1 大剂量组：每日以浓度为0.54g/ml 的水煎剂灌胃，1ml/ 只/天； 马齿苋、大蓟1:1 中剂量组：每日以浓度为0.36g/ml 的水煎剂灌胃，1ml/ 只/天； 马齿苋、大蓟1:1 小剂量组：每日以浓度为0.18g/ml 的水煎剂灌胃，1ml/ 只/天； 1.2.4观察指标及检测指标 共给药 14 天，同时观察⑴小鼠的一般状况及体重变化，⑵做结肠黏膜病理切片 观察结肠黏膜病理形态学变化，⑶造模后及治疗 14 天后对留取小鼠的结肠标本，检 测结肠组织中IL-8 的含量。 2.取材及检测过程 2.1 取材 （1）治疗14 天后脱颈椎处死小鼠，立即沿矢状线正中切开腹部，迅速分离结肠， 用消毒过的镊子及剪刀剖取距2.0cm-10.0cm 处结肠,沿肠系膜纵轴剪开肠腔，用 生理盐水漂洗结肠组织，去除结肠粘膜表面沾附的粪便、分泌物及血液； （2 ）将结肠组织平铺于蜡板上，用放大镜观察粘膜大体形态； （3 ）取溃疡最明显处结肠组织，约 1cm，置于4℃冰箱，于10%甲醛溶液固定24 小时后石蜡包埋，连续切片5 张，HE 染色，光镜下观察组织黏膜病理学改变； （4 ）另取结肠组织0.1g，加入0.9mlPBS 液，冰浴下匀浆，5000r/min 离心2 次， 每次3 分钟；1500r/min 离心5 分钟，取上清液 （1%结肠匀浆液）以备检测IL-8 的含 量。 2.2 粪隐血实验 邻联甲苯胺法:用竹签挑取少量粪便涂于滤纸上，滴加 10g/L 邻联甲苯胺冰乙酸溶液 及3%过氧化氢1～2 滴于滤纸上的标本上。 判断结果：观察是否显色及显色深浅： ⑴ 加入试剂后2min 仍不显色为（-） ⑵ 加入试剂10s 后显浅蓝色渐变蓝色为（+） ⑶ 加入试剂后显浅蓝褐色，且逐渐加深为（++） ⑷ 加入试剂后立即显蓝褐色为（+++） ⑸ 加入试剂后立即显蓝黑褐色为（++++）。 参考值 阴性。 6 17------------------------------ 马齿苋、大蓟水煎剂对溃疡性结肠炎模型小鼠 IL-8 影响的实验研究 2.3HE 染色 ⑴冰冻切片固定 10～30 s ⑵稍水洗 1～2s ⑶苏木染色（60℃） 30～60s ⑷流水洗去苏木 5～10s ⑸1%盐酸乙醇 1～3s ⑹稍水洗 1～2s ⑺促蓝液返蓝 5～10s ⑻流水冲洗 15～30s ⑼0.5%伊红液染色 30～60s ⑽蒸馏水稍洗 1～2s ⑾80%乙醇 1～2s ⑿95%乙醇 1～2s ⒀无水乙醇 1～2s ⒁石炭酸二甲苯 2～3s ⒂二甲苯（Ⅰ） 2～3s ⒃二甲苯（Ⅱ） 2～3s ⒄中性树胶封固。 2.4 指标检测 小鼠结肠组织IL-8 含量测定，用IL-8 试剂盒检测各组样本，操作步骤如下： (1)将试剂盒内各试剂室温平衡20 分钟，从铝箔袋中取出所需板条； (2)设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度（0、7.5、15、30、60、120） 的标准品50ul； (3)样本孔先加待测样本10 ul，再加样本稀释液40 ul；空白孔不加； (4) 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体 100ul，用封板膜封住反应孔，37℃恒温箱温育60min； (5)弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 1min，甩去洗涤液，吸水 纸上拍干，如此重复手工洗版5 次，甩干； (6)每孔加入底物A、B 各50ul ，37℃避光孵育15min ； 7 18------------------------------ 陕西中医学院2013 届硕士学位论文 (7)每孔加入终止液50ul，终止反应； (8) 15min 内，用酶标仪于450nm 波长测定各孔的光密度（OD 值），即 OD450 值。 3.统计方法 各组数据均按均数±标准差( X S )进行分析，采用 t 检验。运用SPSS18.0 统计 软件进行处理。 4.结果与分析 4.1 一般状况与体重变化 4.1.1 一般状况 造模前 小鼠反应灵敏，喜活动，毛色洁白有光泽，食欲正常且主动觅食，粪便质地较硬， 呈暗褐色椭球形小颗粒，未出现稀便、粘液便，肛周洁净，粪便隐血实验均为阴性。 造模后 小鼠明显消瘦，反应迟缓且自主活动减少，喜扎堆，毛色无泽且有脱毛现象，食 欲减退；于造模后第6 天开始出现松软便，便色较浅，与正常鼠粪便有差别，粪 便隐血实验为弱阳性；于造模后第10 天出现松软、不成形稀便，夹杂少量可见 粘液及脓血，与正常鼠粪便有差别，粪便隐血实验为阳性；于造模后第 14 天出 现松软、不成形稀便，夹杂大量可见粘液及脓血，肛周有稀便沾染，与正常鼠肉 眼粪便有明显差别，粪便隐血实验为强阳性。 给药期间小鼠一般情况 空白组： 小鼠喜活动，反应灵敏，毛色光泽，食欲正常，体重增加明显，粪便呈暗褐色颗 粒状，未出现稀便、粘液便，肛周洁净，粪便隐血实验均为阴性。 模型对照组： 小鼠消瘦明显，倦卧喜扎堆，量少，活动缓慢，反应迟钝，毛色无泽，拱背， 皮毛不光洁；可见粘液稀便或血便，肛周沾有稀便。粪便隐血试验均示阳性或弱 阳性。 西药组： 给药7 天时小鼠仍倦怠懒动，反应迟钝，毛色无泽，拱背，竖毛，食欲略好，仍 存在血便，肛周有稀便沾染，粪便隐血实验均为阳性。 8 19------------------------------ 马齿苋、大蓟水煎剂对溃疡性结肠炎模型小鼠 IL-8 影响的实验研究 给药 14 天时小鼠反应较灵敏，活动较前增多，毛色光泽度增加，拱背、竖毛较 前减轻，食欲增加，血便消失，大便松散，粪便隐血实验均为阴性。 马齿苋、大蓟3:1 大剂量组： 给药7 天时小鼠反应较造模期灵敏，活动较前增多，毛色光泽度增加，拱背、竖 毛、脱毛现象较前减轻，主动觅食，多数小鼠仍存在松软、不成形稀便，部分脓 血便消失，粪便隐血实验为弱阳性。 给药14 天时小鼠反应灵敏，活动明显增多，体重增长，毛色光泽，拱背、竖毛、 脱毛现象消失，食欲增加，粪便呈暗褐色颗粒状，未出现稀便、粘液便，肛周洁净， 粪便隐血实验均为阴性。 马齿苋、大蓟3:1 中剂量组： 给药7 天时小鼠反应较造模期灵敏，活动较前增多，毛色光泽度增加，拱背、竖 毛脱毛现象较前减轻，主动觅食，多数小鼠仍存在松软、不成形稀便，少数血便消失， 粪便隐血实验为弱阳性。 给药 14 天时小鼠反应灵敏，活动明显增多，体重略有增长，毛色光泽，拱背、 竖毛、脱毛现象消失，食欲增加，大便成形，血便消失，粪便隐血实验均为阴性。 马齿苋、大蓟3:1 小剂量组： 给药7 天时小鼠仍有倦怠懒动，反应略迟钝，毛色光泽欠佳，拱背，竖毛，食欲 略好，仍存在松软、不成形稀便，少数血便消失，粪便隐血实验为阳性。 给药 14 天时小鼠反应较灵敏，活动较前增多，毛色光泽度增加，拱背、竖毛较 前减轻，食欲增加，血便消失，以排出成形软便为主，粪便隐血实验均为阴性。 马齿苋、大蓟2:1 大剂量组： 给药7 天时小鼠反应较灵敏，活动较前增多，毛色光泽度增加，拱背、竖毛较前 减轻，食欲增加，多数小鼠仍存在松软、不成形稀便，部分血便消失，粪便隐血实验 为弱阳性。 给药 14 天时小鼠反应灵敏，活动明显增多，毛色光泽，拱背、竖毛消失，食欲 增加，粪便呈暗褐色颗粒状，未出现稀便、粘液便，肛周洁净，粪便隐血实验均为阴 性。 马齿苋、大蓟2:1 中剂量组： 给药7 天时小鼠反应较灵敏，活动较前增多，毛色光泽度略增加，拱背、竖毛较 前略减轻，食欲稍增加，多数小鼠仍存在松软、不成形稀便，少数血便消失，粪便隐 9 20------------------------------ 陕西中医学院2013 届硕士学位论文 血实验为弱阳性。 给药 14 天时小鼠反应灵敏，活动明显增多，毛色光泽，拱背、竖毛消失，食欲 增加，大便成形，血便消失，粪便隐血实验均为阴性。 马齿苋、大蓟2:1 小剂量组： 给药7 天时小鼠稍倦怠懒动，反应略迟钝，毛色无泽，拱背，竖毛，食欲略好， 仍存在松软、不成形稀便，少数血便消失，粪便隐血实验为阳性。 给药 14 天时小鼠反应较灵敏，活动较前增多，毛色光泽度增加，拱背、竖毛较 前减轻，食欲增加，血便消失，以排出成形软便为主，粪便隐血实验均为阴性。 马齿苋、大蓟1:1 大剂量组： 给药7 天时小鼠反应较灵敏，活动较前增多，毛色光泽度增加，拱背、竖毛较前 减轻，食欲增加，多数小鼠仍存在松软、不成形稀便，部分血便消失，粪便隐血实验 为弱阳性。 给药 14 天时小鼠反应灵敏，活动明显增多，毛色光泽，拱背、竖毛消失，食欲 增加，粪便呈暗褐色颗粒状，未出现稀便、粘液便，肛周洁净，粪便隐血实验均为阴 性。 马齿苋、大蓟1:1 中剂量组： 给药7 天时小鼠反应较灵敏，活动较前增多，毛色光泽度增加，拱背、竖毛较前 减轻，食欲增加，多数小鼠仍存在松软、不成形稀便，少数血便消失，粪便隐血实验 为弱阳性。 给药 14 天时小鼠反应灵敏，活动明显增多，毛色光泽，拱背、竖毛消失，食欲 增加，大便成形，血便消失，粪便隐血实验均为阴性。 马齿苋、大蓟1:1 小剂量组： 给药7 天时小鼠仍倦怠懒动，反应迟钝，毛色无泽，拱背，竖毛，食欲略好，仍 存在松软、不成形稀便，少数血便消失，粪便隐血实验为阳性。 给药 14 天时小鼠反应较灵敏，活动较前增多，毛色光泽度增加，拱背、竖毛较 前减轻，食欲增加，血便消失，以排出成形软便为主，粪便隐血实验均为阴性。 结果表明： 造模后开始发病，至给药7 天时处于活动期，以炎性改变为主，药对水煎剂各剂 量组小鼠的一般症状改善较快。给药14 天时已经逐渐进入缓解期，以损伤修复为主， 小鼠的一般状况逐渐恢复至造模前，3：1D 组小鼠的一般状况恢复尤为明显。 10 21------------------------------ 马齿苋、大蓟水煎剂对溃疡性结肠炎模型小鼠 IL-8 影响的实验研究 4.1.2 体重变化 造模前： 体重无显著差异。 造模后： 空白组与模型组小鼠体重有显著差异(P0.05)。（见表二） 表二：造模前后模型组和空白组小鼠体重变化(g，X S ) 模型组 空白组 造模前 30.4g±1.28 30.4g±1.28 造模后 27.4g±1.24 30.5g±1.29 给药后：（见表三） 给药7 天：空白组与模型组体重有显著差异(P0.05)；大剂量组与中、小剂量组 有显著差异(P0.05)；3:1 组与1:1 组、2:1 组有显著差异（P0.05)。 给药 14 天：空白组与模型组体重有显著差异(P0.05)；大剂量组与中、小剂量 组有显著差异(P0.05)；3:1 组与1:1 组、2:1 组有显著差异（P0.05)。 表三：治疗后各组和空白组小鼠体重变化(g，X S ) 组别 N(只) 治疗7 天 治疗14 天 1：1 大剂量组 10 30.6±0.95 31.7±0.98 1：1 中剂量组 10 28.6±1.48 29.8±1.17 1：1 小剂量组 10 28.5±1.29 29.1±1.65 2：1 大剂量组 10 29.8±1.39 31.8±1.56 2：1 中剂量组 10 29.1±1.26 29.8±1.29 2：1 小剂量组 10 28.0±0.97 29.8±1.18 3：1 大剂量组 10 31.7±1.69 32.3±1.72 3：1 中剂量组 10 31.6±1.20 31.8±1.31 3：1 小剂量组 10 30.1±1.69 31.3±1.52 西药组 10 30.0±1.23 31.0±1.27 模型对照组 10 28.0±1.33 28.1±1.37 空白组 10 30.6±0.88 30.8±0.96 结果表明： 11 22------------------------------ 陕西中医学院2013 届硕士学位论文 体重是反应机体一般状况的一个客观有效、简单易测的指标，造模后因受到病变 的影响，模型组小鼠体重减轻，不能自行恢复至正常水平。治疗过程中，中药马齿苋、 大蓟水煎剂和西药柳氮磺胺吡啶肠溶片灌胃均可增加小鼠体重，但是受到不同比例， 不同剂量的给药方式的影响，大剂量组效果优于中剂量、小剂量组；3:1 组优于 1:1 组、2:1 组；1:1 组2:1 组中小剂量效果不及西药组，3:1 组各剂量效果相当于西药组。 4.2 结肠的变化 4.2.1 结肠黏膜大体形态观察：各组小鼠的结肠组织大体形态观察。（详见表四 ） 表四 各组小鼠结肠组织观 结肠组织大体形态 组别 造模后 治疗14 天 空白组 结肠粘膜色淡红，无水肿、充血、溃疡及糜烂等表现，肠管弹性正常。 结肠色暗淡，肠粘膜轻度充血、水肿，散在点状糜烂， 模型对照组 肠管弹性欠佳。 结肠色淡红，肠粘膜充血、水肿、糜烂、溃疡好转，肠 西药组 管弹性稍硬。 结肠色淡红，肠粘膜充血、水肿、糜烂、溃疡明显好转， 1:1D 组 肠管弹性可。 结肠色暗或色淡红， 结肠色淡红，肠粘膜充血、水肿、糜烂、溃疡基本消失， 1:1Z 组 可见明显结肠粘膜的 肠管弹性可。 水肿，充血，溃疡面 结肠色淡红，肠粘膜充血、水肿、糜烂、溃疡好转，散 1:1X 组 明显，直径1-4mm 不 在少数点状出血点，肠管弹性欠佳。 等，结肠内均可见 结肠色淡红鲜活，肠粘膜充血、水肿、糜烂、溃疡明显 2:1D 组 血性肠内容物。 好转，肠管弹性可。 结肠色淡红，肠粘膜充血、水肿、糜烂、溃疡基本消失， 2:1Z 组 肠管弹性尚可。 结肠色淡红，肠粘膜充血、水肿、糜烂、溃疡好转，散 2:1X 组 在少数点状出血点，肠管弹性欠佳。 结肠色淡红鲜活，肠粘膜充血、水肿、糜烂、溃疡明显 3:1D 组 好转，肠管弹性可。 12 23------------------------------ 马齿苋、大蓟水煎剂对溃疡性结肠炎模型小鼠 IL-8 影响的实验研究 结肠色淡红，肠粘膜充血、水肿、糜烂、溃疡基本消失， 3:1Z 组 肠管弹性尚可。 结肠色淡红，肠粘膜充血、水肿、糜烂、溃疡好转，散 3:1X 组 在少数点状出血点，肠管弹性尚可。 4.2.2 结肠组织病理形态变化 治疗前 空白组：结肠组织学结构基本正常，粘膜上皮完整，腺体排列整齐、形态正常， 未见坏死、炎性细胞浸润、溃疡等病理学改变。 造模组：具有典型溃疡性结肠炎的病理变化。结肠粘膜上皮损伤，结构，炎 症累及以结肠黏膜和黏膜下层为主，可见多个浅表性溃疡；腺体大部分被，排列 紊乱，结构变形；黏膜和黏膜下层有大量炎性细胞弥漫性浸润，以中性粒细胞和淋巴 细胞居多。 治疗给药14 天后 空白组：结肠组织学结构基本正常，粘膜上皮完整，腺体排列整齐、形态正常， 未见坏死、炎性细胞浸润、溃疡等病理学改变。 模型对照组：粘膜上皮结构仍受损，中性细胞浸润，淋巴细胞、浆细胞较多。腺 上皮间中性炎细胞浸润，杯状细胞减少。隐窝炎症或脓肿形成。其他固有膜血管炎症。 局部黏膜可见脱落、坏死、隐窝，溃疡形成。 西药组（柳氮磺胺吡啶肠溶片组）：中度炎性细胞浸润，肠腺细胞排列不规则， 隐窝数减少，肉芽组织形成，既有瘢痕组织又有基底膜增厚。杯状细胞增多。粘膜下 层纤维化加重，可见淋巴管扩张。固有膜层白细胞浸润明显或大淋巴滤泡出现。溃疡 面积减小，有不同程度愈合。 1：1D 组、2：1D 组、3：1D 组、3：1Z 组：粘膜和黏膜下层充血、水肿明显改 善，未见糜烂、溃疡，粘膜下层纤维化，肉芽组织形成，杯状细胞数目增多，大淋巴 滤泡出现。炎症细胞浸润程度较西药组明显减轻，中性粒细胞、淋巴细胞数量显著减 少。溃疡面积减小，有不同程度愈合。 1：1X 组、1：1Z 组、2：1Z 组：炎性改变均有所减轻。腺上皮间中性炎细胞浸 润，杯状细胞较少，隐窝数目增加，未见明显糜烂、溃疡。 2：1X 组、3：1X 组：粘膜上皮结构不完整，中度炎细胞浸润，中性粒细胞、淋 巴细胞较多，杯状细胞数目较少，偶见浅表性溃疡，部分隐窝炎症形成。 13 24------------------------------ 陕西中医学院2013 届硕士学位论文 结果表明： UC 活检黏膜具有一定的病理特征，能反映活动期UC 的严重性和活动性及缓解期 UC 的恢复表现，与临床症状基本符合。该结果表明，在溃疡性结肠炎活动期炎 症反应和缓解期促进组织修复等，中药马齿苋、大蓟水煎剂可以取得与西药柳氮 磺胺吡啶肠溶片相当的作用。但是受到不同比例，不同剂量的给药方式的影响，大剂 量组效果优于中剂量、小剂量组；3:1 组优于 1:1 组、2:1 组；1：1 大剂量组、2：1 大剂量组、3：1 中剂量组和3：1 大剂量组治疗效果相当于西药组；1：1 小剂量组、 1：1 中剂量组、2：1 中剂量组、2：1 小剂量组、3：1 小剂量组治疗效果不及西药组， 说明中药药对水煎剂的配伍方式和治疗效果有相关性。 4.3 检测指标 4.3.1 造模后：空白组与造模组小鼠结肠组织中 IL-8 的含量有极显著差异(P0.01)。 （见表五） X S 表五：造模前后造模组和空白组小鼠 IL-8 的含量变化 （ ，pg.ml-1） 造模组 空白组 造模前 80.31±11.27 80.35±11.32 造模后 203.12±13.08 80.05±11.18 4.3.2 治疗 14 天后：空白组与造模组小鼠结肠组织中 IL-8 的含量有显著差异 (P0.05)；大剂量组与中、小剂量组有显著差异(P0.05)；3:1 组与1:1 组、2:1 组有 显著差异（P0.05)；中剂量组与西药组无显著差异(P0.05)。（见表六） 表六： 治疗14 天后空白组与其余各组小鼠结肠组织中 X S IL-8 的含量 （ ，pg.ml-1） 组别 N(只) 治疗14 天后 1：1 大剂量组 10 96.86±11.01 1：1 中剂量组 10 98.13±12.07 1：1 小剂量组 10 110.39±10.25 2：1 大剂量组 10 98.54±12.32 2：1 中剂量组 10 109.12±11.03 14 25------------------------------ 马齿苋、大蓟水煎剂对溃疡性结肠炎模型小鼠 IL-8 影响的实验研究 2：1 小剂量组 10 112.23±10.02 3：1 大剂量组 10 90.18±10.17 3：1 中剂量组 10 95.68±11.12 3：1 小剂量组 10 112.60±10.23 西药组 10 112.03±11.22 模型对照组 10 165.27±12.35 空白组 10 83.53±15.23 结果表明： 治疗后，中药马齿苋、大蓟水煎剂和西药柳氮磺胺吡啶肠溶片灌胃均可降低小鼠 肠组织中 IL-8 的含量，但是受到不同比例，不同剂量的给药方式的影响，大剂量组 效果优于中剂量、小剂量、西药组；3:1 组优于1:1 组、2:1 组、西药组。中剂量组与 柳氮磺胺吡啶肠溶片效果相当，1:1 组2:1 组中小剂量效果不及柳氮磺胺吡啶肠溶片， 3:1 大剂量组效果最佳。 5.讨论 5.1 指标的选择 从现有的报道看，参与UC 发病机制的因素有免疫、遗传、肠道菌群失调及神经 等，研究发现细胞因子在肠道免疫反应中起着关键性的作用。细胞因子是由Th0 细胞分化而来的，分为Th1 和Th2 细胞，Th1 分泌的细胞因子（IL-2、IL-6、IL-8、 TNF- β等）主要介导细胞毒和局部炎症有关的免疫应答，辅助抗体生成，参与细胞免 疫及迟发型超敏型炎症的发生，故称为炎症性T 细胞；Th2 分泌的细胞因子（IL-4、 IL-5、IL-10 等）与体液免疫有关，肥大细胞、嗜酸性粒细胞等受到抗原刺激后产生 大量的IL-4、IL-10IFN-r 和IL-12 的分泌，进而阻断Th0 细胞向Th1 细胞的极 化。Th0 细胞向Th1 或Th2 细胞的极化受到局部的细胞因子浓度、免疫活性激素、抗 原的类型和浓度、抗原呈递细胞的类型及细胞受体与主要组织相容性复合体(major histocompabilitycomplex, MHC) 的亲和力的强弱等多种因素的影响。机体正常 时,Th1 和 Th2 细胞功能处于动态平衡状态, 维持机体正常的细胞免疫和体液免疫功 能；当机体受到抗原时,Th1 和Th2 细胞中某一亚群功能升高,另一亚群功能 降低,该现象即为Th1/Th2 漂移。本研究主要选取了IL-8 作为检测指标，它们的变化 即反应了Th1/Th2 漂移现象，说明细胞因子在UC 发病中起到了免疫调节及促进炎症 15 26------------------------------ 陕西中医学院2013 届硕士学位论文 反应的作用。 IL-8 是一种主要由中性粒细胞产生的强有力的中性粒细胞趋化因子和活化因 子，由单核细胞、上皮细胞、表皮细胞、纤维母细胞及T 淋巴细胞在IL-1、TNF 和外 源性因子细菌多糖(LPS)的刺激下产生，主要生物学作用是趋化并激活中性粒细胞， 促进中性粒细胞的溶酶体酶活性和作用，对嗜碱性粒细胞和T 细胞也有一定的趋 化作用，中性粒细胞与 IL-8 接触后发生形态变化，定向游走到反应部位并一系 [5] 列活性产物，这些作用可导致机体局部炎症反应，达到杀菌和损伤细胞的目的 。 5.2 对照药物的选择 目前一致治疗UC 的首选药物为柳氮磺胺吡啶(SASP)。1942 年Dana Svartz 医师首先将柳氮磺胺吡啶应用于溃疡性结肠炎的治疗，取得了良好的效果，成为溃疡 [1] 性结肠炎治疗的一个里程碑 。自从柳氮磺胺吡啶作用于溃疡性结肠炎的维持治疗 后，复发率降为原来的1/4，并大大改善了许多患者的生活质量。柳氮磺胺吡啶的药 理作用是多方面的，⑴抗炎作用：目前一致认为柳氮磺胺吡啶实际上起着一种载体的 作用，将具有抗炎药理作用的 5-氨基水杨酸转运至结肠部位，使后者在结肠腔中保 持较高的浓度，在治疗溃疡性结肠炎中发挥抗炎效果；⑵调节机体的免疫功能：柳氮 磺胺吡啶对于由促丝裂素的淋巴细胞的细胞毒作用有效应。它还可以由 美洲商陆刺激外周血或肠黏膜单核细胞产生 IgG、IgM 和 IgA，且呈剂量效应关系， 此外还能人中性粒细胞的趋化功能、作用、脱颗粒作用等；⑶影响花生四烯 酸的代谢：通过影响花生四烯酸的代谢，使炎症介质（前列腺素、白三烯 B LB 5- 4, 4、 羟基二十碳四烯酸，5-HETE）的生成减少，有利于炎症的好转及减轻肠黏膜的损伤程 度。结合目前对UC 发病病因、病机的研究及临床治疗情况我们选用柳氮磺胺吡啶作 为对照药进行观察具有可比性，有一定的对照意义。 5.3 造模方法的选择 目前溃 推荐：
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